2.5 回收率计算 分别用空白血浆和水配制两组低、中、高三个浓度水平的托吡酯,每种浓度平行制备3份,然后计算得到的托吡酯和内标的提取回收率分别为92.1%和85.2%。 2.6 准确度与精密度计算 采用同样方法配制低、中、高三种浓度水平,每个浓度水平下平行处理3份,其中日间紧密度则要连续考察3d,日内精密度将配制的低、中、高溶液连续进样分析。实验结果显示日内和日间精密度的RSD分别为4.4%和4.5%。 2.7 浓度计算 分别精密吸取不同的血浆样品,制备样品溶液,每批样品进样3次,根据外标法计算3批血浆样品中的托吡酯的含量,结果见表1。其平均浓度为0.260?g/mL。 3 讨论 癫痫患者常伴有认知功能损害,是多因素综合作用的结果。虽然癫痫预后比较差,但是治疗方法比较多[4-5]。多选择抗癫痫药物来控制癫痫,目前临床上常 用抗癫痫药物都是经过长期大量反复临床试验的来的,每种药物有效率都在70%~80%以上[6-7]。其中托吡酯是结构全新的新一代抗癫痫药,临床应用安 全有效。其可以增强部分电压门控及钙门控钾离子通道电流;增加非苯二氮类γ-氨基丁酸α受体亚型介导的氯离子内流;阻断电压门控钠离子通道,阻断L型高电 压门控钙离子通道[8-9]。 在生物样品的血药浓度分析中,高效液相色谱具有高精确性、高灵敏度、高选择性的特点,已成为当代最重要的分离分 析方法之一[10-13]。本研究托吡酯在240nm和260nm处均有最大吸收,但240nm处干扰物质比较多,故本实验的检测波长设为260nm。本 研究经过液相色-质谱联用分析,得到托吡酯的线性方程为Y=6.25×10-4X+1.08×10-2,线形范围为0.05~10.00?g/mL。托吡 酯的提取回收率为92.1%,在日内和日间精密度的RSD分别为4.4%和4.5%,在血浆中的平均浓度为0.260?g/mL。 总之,高效液相色谱测定血人体浆中托吡酯的浓度方法简单、可行、灵敏度高,具有良好的回收率、准确度和精密度。 [参考文献] [1] 权青云,赵静霞.抗癫痫药物及其对认知功能影响的研究进展[J].国际神经病学神经外科学杂志,2009,36(1):69-72. [2] 韩仰,谭志荣,欧阳冬生,等.快速灵敏的HPLC方法检测人血浆中贝凡洛尔的浓度[J].中国新药杂志,2009,18(22):2160-2162. [3] 卢强,吴立文,王莎丽,等.托吡酯单药和添加治疗癫痫发作的疗效观察[J].中国医院药学杂志,2003,23(6):537-538. [4] 许春伶,潘映福,孙迪,等.托吡酯单药治疗癫痫发作的疗效观察[J].临床神经病学杂志,2003,16(5):303-304. [5] Kang HC,Eun BL,Wu Lee C,et al.The effects on cognitivefunction and behavioral problems of topiramate compared to carbam-azepine as monotherapy for childrenwith benign rolandic epilepsy[J].Epilepsia,2007,48(12):1716-1723 [6] Chen J,Quan QY,Yang F,et al. Effects of lamotrigine and topi-ramate on hippo campal neurogenesis in experimental temporal-lobeepilepsy[J].Brain Res,2010,8(8):270-282. [7] 张志锋,李婧,肖红涛,等.HPLC-MS-MS法测定人血浆中苯磺酸氨氯地平的浓度及其药动学[J].西南民族大学学报(自然科学版),2009,35(4):776-780. [8] 王伟,刘永锁,乔湜,等.同时测定人血浆中4种国产与进口抗癫痫药浓度的超高效液相色谱-质谱联用法的建立[J].中国临床药理学杂志,2014,9(12):807-809. [9] 董必能,赵和华,袁亚玲.癫痫病人撤换苯妥英钠和苯巴比妥的临床研究[J].西部医学,2009,21(7):112-114. [10] 郑乃智,王敏,邢振华,等.癫(癎)治疗中的药物经济学研究进展[J].癫癎与神经电生理学杂志,2011,20(1):67-69. [11] 田季雨,黄远桂,胡安恒,等.托吡酯多中心开放性治疗老年癫痫的临床观察[J].中华神经医学杂志,2008,7(10):56-58. [12] 甘川.左乙拉西坦在儿童癫痫治疗中的疗效及安全性研究进展[J].现代医药卫生,2013,29(14):221-223. [13] 朱国行,吴洵昳,虞培敏,等.新诊断癫痫患者的规范化药物治疗[J].中华神经科杂志,2011,44(1):110-112. |